本试剂盒基于荧光定量分析技术，用于马源性成分快速鉴定检测分析，具有高效、快速、准确的特点，可进行批量样本快速检测。用于检测固体或液体类食品等样品中有无马源性特定成份,是政府检测机构、食品加工企业、进出口贸易标准的检测方法，与国家检测标准、欧盟检测标准相一致。 检测结果仅供参考。

TMB底物液
底物显色液
ELISA 显色液

用于HRP标记的ELISA；单一组分，稳定，使用方便，灵敏度高。主要成分是3,3’,5,5’–四甲基联苯胺[3,3’,5,5’- tetramethylbenzidine(TMB)],是辣根过氧化物酶（HRP）的底物，在辣根过氧化物酶的作用下，发生氧化剂反应生成蓝色产物。颜色的强弱与HRP的活性呈正比，从而可以用于基于HRP标记物的检测。

根据使用的数量，将该次需要的TMB显色液从大瓶转移的干净的避光小瓶中，后续从小瓶中取用:

1) 加液：加完HRP结合物并温育一定时间后，洗板3-5次，每孔加TMB显色液100μL - 200μL。  

2) 根据个人实验需要，在室温（15-25℃）或37°C下温育10-30分钟。

3) 终止：加50微升的2M盐酸或硫酸溶液终止反应，孔中反应液由蓝色变为黄色。

4) 读数：终止反应后30分钟内在450nm处读数。

如果出现高的反应背景或沉淀，表明TMB底物反应过于强烈。为了避免产生沉淀，可在终止后马上

读数；或者进一步稀释一抗和/或HRP结合物

根据不同浓度的标准品平行样检测得到的OD值录入到Tetrodotoxin ELISA软件中对应浓度的表格中，即可获得如图1所示标准曲线。根据检测样品编号把样品提取液检测得到的OD值录到TTX         ELISA软件的下方对应的表格中，即可获得样品提取液中河豚毒素的浓度C（ng/mL）。