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单组份底物显色液

用于HRP标记的ELISA;单一组分,稳定,使用方便,灵敏度高。
主要成分是3,3’,5,5’–四甲基联苯胺(3,3’,5,5’- tetramethylbenzidine(TMB)),是辣根过氧化物酶(HRP)的底物,在辣根过氧化物酶的作用下,发生氧化剂反应生成蓝色产物。颜色的强弱与HRP的活性呈正比,从而可以用于基于HRP标记物的检测。

试剂组成


试剂组成

名称数量规格
马探针qPCR MIX1 管800μL/ 管
马阳性质控品1 管50μL/ 管
马阴性质控品1 管200μL/ 管
核酸提取液1 瓶6mL

应用范围

本试剂盒基于荧光定量分析技术,用于马源性成分快速鉴定检测分析,具有高效、快速、准确的特点,可进行批量样本快速检测。用于检测固体或液体类食品等样品中有无马源性特定成份,是政府检测机构、食品加工企业、进出口贸易标准的检测方法,与国家检测标准、欧盟检测标准相一致。 检测结果仅供参考。

其他名称

TMB底物液
底物显色液
ELISA 显色液

产品描述

用于HRP标记的ELISA;单一组分,稳定,使用方便,灵敏度高。主要成分是3,3’,5,5’–四甲基联苯胺[3,3’,5,5’- tetramethylbenzidine(TMB)],是辣根过氧化物酶(HRP)的底物,在辣根过氧化物酶的作用下,发生氧化剂反应生成蓝色产物。颜色的强弱与HRP的活性呈正比,从而可以用于基于HRP标记物的检测。

操作步骤

根据使用的数量,将该次需要的TMB显色液从大瓶转移的干净的避光小瓶中,后续从小瓶中取用:

1) 加液:加完HRP结合物并温育一定时间后,洗板3-5次,每孔加TMB显色液100μL - 200μL。  

2) 根据个人实验需要,在室温(15-25℃)或37°C下温育10-30分钟。

3) 终止:加50微升的2M盐酸或硫酸溶液终止反应,孔中反应液由蓝色变为黄色。

4) 读数:终止反应后30分钟内在450nm处读数。


如果出现高的反应背景或沉淀,表明TMB底物反应过于强烈。为了避免产生沉淀,可在终止后马上

读数;或者进一步稀释一抗和/或HRP结合物

标准曲线的绘制与计算

根据不同浓度的标准品平行样检测得到的OD值录入到Tetrodotoxin ELISA软件中对应浓度的表格中,即可获得如图1所示标准曲线。根据检测样品编号把样品提取液检测得到的OD值录到TTX         ELISA软件的下方对应的表格中,即可获得样品提取液中河豚毒素的浓度C(ng/mL)。

溶液配制

所用仪器、试剂

试剂盒组成

标准品6瓶:0ppb、8ppb、16ppb、32ppb、64ppb、128ppb(1mL/瓶)。

酶标板12条×8孔
酶标抗体6mL
TMB显色液12mL
终止液7mL
浓缩洗涤液30mL  20×
PBS溶液30mL
密封膜2
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